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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品簡介
RKO-AS45-1人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞人的cDNA中編碼GADD45的開放閱讀框克隆到表達(dá)載體pCMV.3中，轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞RKO，建立了RKO-AS45-1細(xì)胞株。RKO-AS45-1細(xì)胞含有穩(wěn)定整合巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動(dòng)子的表達(dá)載體，RKO-AS45-1細(xì)胞系和它的母系RKO一起可用于GADD45對DNA修復(fù)、凋亡和藥物敏感性研究。
產(chǎn)品分類
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RKO-AS45-1人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞
簡稱：RKO-AS45-1
中文名：人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞
別名：RKO-AS-45-1; RKOAS451; RKO_AS45
種屬：人
來源：結(jié)腸癌，整合起動(dòng)GADD45a表達(dá)載體的CMV啟動(dòng)子
培養(yǎng)基：MEM
狀態(tài)：貼壁
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟：
1. 吸走多余培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞；
2. 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化；
（細(xì)胞對于消化比較敏感，消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時(shí)即可終止，禁止消化到細(xì)胞*漂浮?；靹蚣?xì)胞時(shí)盡量輕柔，不要吹出大量氣泡。）
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻；
4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。
Cell cryopreservation
1.凍存液：92%*培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min，-20度2h，-80過夜后液氮保存。
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